细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases，ERK)是丝、苏氨酸蛋白激酶的一种，可用来传递丝裂原信号^[1]，该酶存在于正常细胞的胞浆中，当被引物激活后传递至细胞核，参与细胞的减数分裂、有丝分裂等一系列生理过程，调节转录因子的活性，产生细胞效应^[2]。近些年研究，细胞外信号调节激酶5(ERK5)是最新发现的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)家族中的一个重要的一级激酶，在心血管系统疾病、神经系统疾病、肿瘤治疗等方面作用逐渐在临床上被重视，是MAPK通路之一^[3]，在细胞增殖、肿瘤转移恶化、血管增生等方面呈高水平表达。鼻息肉患者鼻腔和鼻窦黏膜内细胞水肿，在鼻道内可形成单发和多发的息肉组织^[4]，有文献指出，息肉组织持续性增生状态与ERK5存在一定的关系。本研究主要探讨ERK5在鼻息肉细胞中的表达和意义，旨在为了解鼻息肉发生机制，为鼻息肉的诊断和治疗提供客观依据。

根据我国2012年昆明慢性鼻-鼻窦炎(chronic rhinitis sinusitis，CRS)诊疗标准^[5]，将CRS分为伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps，CRSwNP)或不伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis without nasal polyps，CRSsNP)两种亚型。分析2013年1月至2014年12月在聊城市第二人民医院耳鼻咽喉科手术治疗72例CRS患者的临床资料。术前根据患者的临床症状、体征、鼻内镜检查及鼻窦CT影像学资料进行诊断。选取其中37例CRSwNP患者为实验组(CRSwNP组)，男24例，女13例，(41.72±11.06)岁。选取35例CRSsNP患者作为对照组(CRSsNP组)，其中男19例，女16例，(38.43±9.37)岁。所有研究对象自愿参加此项研究，遵守研究规定，了解并遵守治疗流程，自愿签署书面知情同意书。两组研究对象在其他临床资料水平比较上差异无统计学意义(P＞0.05)。

抽取两组研究对象清晨静脉血3 mL，离心后置于－20 ℃环境下保存。采用酶联免疫试验(ELISA)试剂盒测定血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素5(Interleukin-5，IL-5)和白细胞介素8(Interleukin-8，IL-8)水平。

将CRSwNP组息肉组织(均已经病理证实)和CRSsNP组采集的取自窦口鼻道复合体黏膜进行裂解，充分裂解后离心5 min取上层清液。提取细胞总蛋白，采用改良Lowery法测定蛋白浓度。取上层清液进行电泳，结束后转膜，加入ERK5单克隆抗体在4 ℃摇床上孵育过夜，使用缓冲液进行冲洗，加入驴抗山羊单克隆IgG抗体，室温孵育2 h后加入ECL显色试剂放射显影^[6]。

采用SPSS 19.0软件，计量资料以$\overline x \pm s$表示，行t检验；计数资料采用χ²检验。采用Pearson相关性检验分析鼻息肉组患者ERK5表达与TNF-α、IL-8相关性。检验水准取α=0.05，P＜0.05为差异有统计学意义。

本研究共选入研究对象72例，其中CRSwNP组37例，CRSsNP组35例。两组患者一般资料详细情况见表 1。比较两组受试者的性别比例、年龄、体质量指数(BMI)、吸烟及饮酒史，差异均无统计学意义(P＞0.05)。

表1(Tab. 1)

表1 两组研究对象一般临床资料比较Tab. 1 Comparison of clinical data between the two groups 指标 CRSwNP组 (n=37) CRSsNP组 (n=35) t/χ2 P值 男/女 24/13 19/16 0.837 0.360 年龄($\overline x \pm s$，岁) 41.72±11.06 38.43±9.37 1.358 0.179 BMI($\overline x \pm s$) 25.21±3.75 24.85±2.69 0.471 0.639 吸烟史 1.961 0.161 是 26 19 否 11 16 饮酒史 0.453 0.501 是 28 24 否 9 11

表1 两组研究对象一般临床资料比较 Tab. 1 Comparison of clinical data between the two groups

CRSwNP组患者血清中TNF-α(t＝16.7，P<0.001)、IL-5(t＝13.81，P＜0.001)和IL-8(t＝8.642，P＜0.001)含量显著高于对照组。

表2(Tab. 2)

表2 两组研究对象血清中TNF-α、IL-5和IL-8含量比较($\overline x \pm s$)Tab. 2 Comparison of serum TNF-α、IL-5 and IL-8 level between the two groups($\overline x \pm s$) 指标 CRSwNP组 (n=37) CRSsNP组 (n=35) t/χ2 P值 TNF-α(μg/L) 32.76±11.39 0.59±0.21 16.700 <0.001 IL-5(ng/L) 243.48±36.52 89.64±56.39 13.810 <0.001 IL-8(ng/L) 869.75±492.83 136.21±98.17 8.642 <0.001

表2 两组研究对象血清中TNF-α、IL-5和IL-8含量比较($\overline x \pm s$) Tab. 2 Comparison of serum TNF-α、IL-5 and IL-8 level between the two groups($\overline x \pm s$)

经Western Boltting检测发现，CRSwNP组中ERK5蛋白表达水平显著高于CRSsNP组(灰度比1.21±0.16 vs 0.36±0.04，P＜0.01),见图 1。

图1(Fig. 1)

图1 两组研究对象细胞ERK5蛋白表达情况 Fig. 1 Exprssion of ERK5 protein in the two groups

采用Pearson相关性检验分析CRSwNP组患者ERK5蛋白表达与TNF-α、IL-8相关性，结果发现，CRSwNP组患者ERK5蛋白表达与TNF-α(r＝0.521，P＝0.001)及IL-8(r＝0.479，P＝0.003)呈显著正相关,见图 2。

图2(Fig. 2)

图2 CRSwNP组患者ERK5蛋白表达与TNF-α、IL-8相关性分析 Fig. 2 Correlation between the expression of ERK5 protein and TNF-α and IL-8 level in patients of CRSwNP group

鼻息肉是多种因素所致的鼻黏膜慢性炎性病变，发病机制尚未完全明确，主要与鼻部纤毛形态结构和功能障碍、微环境变化影响、嗜酸性粒细胞的作用和细胞因子的作用有关^[7]。鼻部黏膜纤毛结构异常，黏液物理特性发生异常，使得纤毛功能发生障碍，外界细菌大量进入鼻腔，在鼻腔内大量积聚，使鼻部和下呼吸道反复感染，容易诱发息肉的产生^[8]。中鼻道附近、钩突或筛泡表面及半月裂狭窄或局部黏膜肿胀，导致纤毛活动受限为息肉的产生创造了条件^[9]。产生息肉的组织间常常有大量的嗜酸性细胞浸润，发生细胞毒作用，损伤鼻部上皮细胞和组织。息肉发生时黏膜上皮血管通透性增高、组织水肿、上皮细胞破裂、细胞外基质大量增生、血管及腺体膨胀，逐渐形成息肉^[10]。广义而言，炎症是一种机体对感染和损伤的自我保护机制，而炎性细胞的长期浸润，且不断释放的炎性介质和细胞因子(如TNF-α、IL-5、IL-8等)相互作用，促进鼻黏膜局部炎症反应不断循环扩大。

本研究结果发现，CRSwNP组患者血清中TNF-α、IL-5和IL-8含量显著高于对照组，表明鼻息肉的产生是一种多种细胞因子参与的I型变态反应，TNF-α可以促进T淋巴细胞MHC I类抗原表达，增强胸腺细胞、T细胞增殖能力和IgA的分泌产生。TNF-α可以抑制病毒复制、阻碍病毒蛋白的合成、降低病毒的感染性，从而杀伤病毒细胞。IL-5可以促进B淋巴细胞的增殖和分化，诱导嗜酸性粒细胞的产生，诱导细胞毒T细胞的生成，促进分泌型IgA的生成。IL-8是由单核-巨噬细胞生成，激活中性粒细胞，中性粒细胞与IL-8结合后形状发生改变，特异性地释放若干活性产物，诱导机体局部炎症反应，杀灭侵入的细菌，损伤炎症周围细胞。Western-Boltting检测结果发现，在CRSwNP组中ERK5表达水平显著高于正常组，说明息肉组织增生与周围血管生成与ERK5通路激活有关。ERK5表达与TNF-α及IL-8呈现显著正相关，TNF-α可通过激活ERK1/2、ERK5、P-38、C-JNK等MAPK链的四个亚族，加速细胞外基质降解及黏膜上皮细胞的损伤。ERK5通路可在氧化作用下被激活，诱导细胞增殖，TNF-α等炎症因子高表达，可激活ERK5信号传导途径促进IL-6、IL-8等炎症因子的生成^[11]。

综上所述，ERK5在CRSwNP患者中高水平表达，且与TNF-α及IL-8呈显著正相关关系。