山东大学耳鼻喉眼学报

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塞来昔布诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的实验研究

赵永强1,冯慧伟1,于克娜1,石梅2,范献良1   

  1. 1.山东大学第二医院耳鼻咽喉-头颈外科, 山东 济南  250033;
     2.山东大学生命科学学院, 山东 济南  250100
  • 收稿日期:2013-12-20 出版日期:2014-04-16 发布日期:2014-04-16
  • 通讯作者: 范献良,教授,硕士生导师。 E-mail:sdentfan@126.com
  • 作者简介:赵永强。 E-mail:itismone@126.com

Apoptosis  of Hep-2 cells induced  by celecoxib

ZHAO Yong-qiang1,  FENG Hui-wei1, YU Ke-na1, SHI Mei2, FAN Xian-liang1   

  1. 1. Department of Otolaryngology &  Head and Neck Surgery,  Second Hospital of Shandong University, Jinan  250033, Shandong, China; 2. Department of Biology Science, Shandong University, Jinan 250100, Shandong, China
  • Received:2013-12-20 Online:2014-04-16 Published:2014-04-16

摘要: 目的    探讨环氧化酶-2特异抑制剂——塞来昔布对喉癌Hep-2细胞增殖抑制和凋亡诱导作用及可能机制。方法    以不同浓度的塞来昔布处理喉癌Hep-2细胞,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测对细胞增殖的影响, Hoechst33342染色荧光显微镜下观察细胞核的形态改变,以Annexin V/PI双染法检测细胞的凋亡率,Western blot检测Bcl-2、Bax及COX-2的表达, Western blot分析Caspase-3裂解激活。结果    MTT结果表明塞来昔布抑制Hep-2细胞的增殖呈时间和浓度依赖;Hoechst33342 荧光染色见随塞来昔布处理时间延长,细胞核逐渐出现凝集、碎裂等凋亡表现;流式细胞术检测细胞凋亡率见塞来昔布处理细胞24h, 70、100μmol/L组凋亡率分别为(28.9±2.74)%、(32.7±3.96)%;Western blot分析蛋白表达,见随药物处理浓度增加,COX-2、Bcl-2表达降低,Bax表达增加,随药物处理时间延长Caspase-3出现裂解片段。结论    塞来昔布能够有效地抑制Hep-2细胞增殖和诱导Hep-2细胞凋亡,其诱导凋亡作用机制可能与Bax/Bcl-2比值升高,Caspase-3蛋白裂解激活有关。

关键词: 环氧化酶-2, 凋亡, Hep-2细胞, 塞来昔布

Abstract: Objective    To investigate the mechanism of celecoxib, a COX-2 inhibitor, in inducing cell apoptosis in human laryngocarcinoma Hep-2 cells. Methods    MTT was used to observe the proliferation of Hep-2 cells treated with various doses of celecoxib. Cell apoptosis was determined by flow cytometry and morphologic observation under fluorescent microscopy with Hoechst33258 staining. Protein expressions of Bax, Bcl-2, COX-2 were examined  by western blot. Caspase-3 activation was examined  by western blot. Results    MTT results showed that celecoxib could inhibit the proliferation of Hep-2 cells in a time- and concentration- dependent manner. Hoechst33342 fluorescent staining showed the nucleus gradually appeared agglutination and  fragmentation after the treatment of celecoxib. Apoptosis rate in the groups treated with 70 and 100μ mol/L celecoxib  were (28.9±2.74)% and (32.7±3.96)% correspondingly. Wwestern blot showed that celecoxib could down-regulate the levels of expressions of COX-2 and Bcl-2 protein, up-regulate Bax protein’s expression, and activate caspase-3. Conclusion    Celecoxib  can effectively inhibit the proliferation of Hep-2 cells and induce the apoptosis of Hep-2 cells. The induction of apoptosis may be related to the increased Bax/Bcl-2 ratio  and activation of  caspase-3.

Key words: Hep-2 cell, Cyclooxygenase-2, Apoptosis, Celecoxib

中图分类号: 

  • R739.65
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