靶向性重组TRAIL基因诱导人黑色素瘤细胞株A375凋亡的效应

山东大学耳鼻喉眼学报

靶向性重组TRAIL基因诱导人黑色素瘤细胞株A375凋亡的效应

朱春生，陈剑秋

济南军区总医院耳鼻咽喉头颈外科，济南 250031

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-10-16 发布日期:2008-10-16
通讯作者: 朱春生

Apoptotic effect of human maligant melanoma cell line A375 induced by tumor-specific recombinant TRAIL gene

ZHU Chun-sheng, CHEN Jian-qiu

Department of Otolaryngology & Head and Neck Surgery, Jinan Military General Hospital, Jinan 250031, China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-10-16 Published:2008-10-16
Contact: ZHU Chun-sheng

摘要/Abstract

摘要： 目的研究TRAIL基因结合端粒酶启动子特异性靶向治疗的作用。方法刺激人外周血淋巴细胞增殖，提取总DNA。采用RT-PCR扩增含有IL-2信号肽和TRAIL功能区的融合基因，克隆入pGL3-181hTERT肿瘤特异性端粒酶启动子的下游，构建TRAIL基因的重组真核表达载体pGL3-181hTERT/TRAIL。将该重组载体经阳离子脂质体转染入人黑色素瘤细胞株A375中，以台盼蓝拒染法和电镜下细胞形态变化，观察转染的A375细胞的凋亡。结果构建了肿瘤人可溶性TRAIL基因的重组真核表达载体pGL3-181hTERT/TRAIL，其表达产物能诱导人黑色素瘤细胞株A375凋亡。结论成功地构建了重组真核表达载体pGL3-181hTERT /TRAIL，为肿瘤的基因靶向治疗提供了可能性。

关键词: TRAIL, 端粒酶启动子, 凋亡, 基因治疗

Abstract: To explore the targeted gene therapy of tumors by using the TRAIL gene in combination with the telomerase promoter. MethodsTotal RNA was extracted from peripheral blood lymphocytes (PBL) whose proliferation had been stimulated. The TRAIL gene with an IL-2 signal peptide gene was amplified by RT-PCR and cloned into the vector pGL3-181hTERT downstream of the hTERT promoter to form a eukaryotic expressing vector. A375 cells were transfected by the recombinant vector and apoptosis of the transfected cells was evaluated by rypan-blue exclusion and transmission electron microscopy (TEM). ResultsWe successfully constructed a recombinant eukaryotic expression vector for the TRAIL gene. The expressed product significantly induced the apoptosis of the A375 cells. ConclusionThe recombinant eukaryotic expression vector pGL3-IL-181hTERT/TRAIL was successfully constructed, which provides the possibility for gene therapy of tumors.

Key words: Telomerase promoter, Apoptosis, TRAIL, Gene therapy

中图分类号:

R739.63

朱春生,陈剑秋 . 靶向性重组TRAIL基因诱导人黑色素瘤细胞株A375凋亡的效应[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2008, 22(5): 408-411 .

ZHU Chun-sheng,CHEN Jian-qiu . Apoptotic effect of human maligant melanoma cell line A375 induced by tumor-specific recombinant TRAIL gene[J]. JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY (OTOLARYNGOLOGY AND OPHTHALMOLOGY), 2008, 22(5): 408-411 .

参考文献

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