山东大学耳鼻喉眼学报

• 论文 • 上一篇    下一篇

抑制表皮生长因子受体基因表达的pSIREN-ShuttleRNAi表达载体的构建

栾建刚1, 梁传余2, 文艳君3, 李炯3   

  1. 1.青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院耳鼻咽喉科,山东 烟台 264000;2.四川大学华西医院耳鼻咽喉科,四川 成都610041;3.四川大学华西医院,国家重点生物治疗实验室,四川 成都610041
  • 收稿日期:2005-12-12 修回日期:2005-12-20 出版日期:2006-02-25 发布日期:2006-02-25

Construction of RNAi expressing plasmid vector of pSIRENshuttle for EGFR gene silencing

LUAN Jiangang1, LIANG Chuanyu2,WEN Yanjun3, LI Jiong3   

  • Received:2005-12-12 Revised:2005-12-20 Online:2006-02-25 Published:2006-02-25

摘要: [摘要]目的:构建抑制表皮生长因子受体(EGFR)基因表达的RNA干扰(RNAi)质粒表达载体pSIRENShuttleEGFR。方法:化学合成3条编码短发夹RNA序列的、特异靶向EGFR基因的寡核苷酸链,各69个碱基,退火,克隆到RNAiReady pSIRENShuttle载体的人源U6启动子的下游,重组构建RNAi质粒, 3种载体转染人鼻咽癌细胞株(CNE),用RT-PCR 分析pSIRENShuttleEGFR载体对EGFR基因的mRNA表达抑制效果。结果:重组构建的pSIRENShuttleEGFR载体经插入基因片段序列分析,表明69个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致。CNE细胞EGFR基因的mRNA被明显抑制。结论:RNAi质粒表达载体介导对EGFR基因的RNA干扰可能是鼻咽癌干预治疗的一种有效手段。

关键词: 受体, 表皮生长因子, RNA, 信使, RNA, 干扰, RNA

Abstract: [ABSTRACT]Objective: To construct an expressing vector (pSIRENShuttleEGFR ) of RNAi in order to suppress gene expression of epidermal growth factor receptor (EGFR). Methods: Three 69 basepair oligos coding hairpin RNA which specifically aimed at EGFR gene were chemically synthesized and annealed, then inserted into the downstream of U6 promoter of vector to construct RNAi plasmid (pSIRENShuttleEGFRs). Sequence analysis was used to identify the correction of recombinant vector. RT-PCR was performed on the CNE cell line transfected by pSIRENShuttleEGFRs. Results: Sequencing analysis demonstrated that 69 bp had been inserted into expected site and the insertion sequence was exactly correct in recombinant pSIRENShuttleEGFRs vectors. It was showed that usingthe plasmid vector pSIRENEGFRs to induce RNAi suppressed the expression of endogenous EGFR in CNE human nasopharyngeal epidermal carcinoma cells. As a consequence, the mRNA of EGFR was decreased. Conclusion: RNAimediated inhibition of EGFR gene induced by shRNA expressing plasmid vector may constitute a useful approach in the treatment of human nasopharyngeal epidermal cancer.

Key words: epidermal growth factor, RNA, Receptor, messenger, RNA, interference, RNA

[1] 刘佳珲,田汝宪,李玉梅,宋西成. 构建铜死亡相关lncRNA模型评估头颈鳞状细胞癌预后[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2026, 40(2): 49-64.
[2] 朱江,刘太祥,江兵. 经鼻内镜下泪囊鼻腔吻合手术前后结膜囊菌群变化[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2026, 40(1): 13-20.
[3] 唐茜,黄茂凌,张吉强,钟诚. 不同发育时期小鼠初级听觉皮层中芳香化酶及雌激素受体表达与听力的相关性[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2025, 39(6): 46-53.
[4] 秦娜娜,李玉芬,孙雨浩,魏健,李钦. 基于TGF-β1/Smad信号通路探讨白细胞介素13受体α2对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织重塑的影响[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2025, 39(6): 71-77.
[5] 盘琳琳,万佳明,李越,何龙. 自噬相关LncRNA是头颈部鳞状细胞癌的预后指标[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2025, 39(6): 97-107.
[6] 王盛,李银丹,杨金姬. microRNA在鼻咽癌中的作用及其研究进展[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2025, 39(5): 125-131.
[7] 窦涛,窦乃馨,汪如,杨芊,管庆波,王磊,于春晓. miRNA-mRNA网络参与高脂饮食损伤甲状腺功能的生物信息学分析[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2025, 39(4): 151-160.
[8] 乐冰艳,邹剑,雷蕾,文巧,钱应雪. 儿童扁桃体微生物群与免疫调节及疾病关联[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2025, 39(4): 193-200.
[9] 张茂华,魏日富,朱忠寿,刘平,高尚,李慧凤. LncRNA PCAT-1对鼻咽癌细胞生物学行为及化疗敏感性的影响[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2025, 39(1): 68-76.
[10] 杨淞月,张美霞. 单细胞RNA测序技术在视网膜中的研究进展[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2025, 39(1): 162-170.
[11] 杨贵,胡田勇,贺海鹏,马莉,魏海峰,黄佳敏,刘志强. Der p2 B细胞表位RNA疫苗制备及其对过敏性鼻炎小鼠特异性IgE抑制作用[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2024, 38(5): 6-12.
[12] 张金木,郭滨,蒋文君,刘冬梅. M受体信号通路在近视发生发展中作用的研究进展[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2024, 38(5): 160-164.
[13] 张永财,张江,卢慧,邢可欣,吴靖芳,薛刚,李燕萍,刘延彬. CXCL10及IFN-γ在上颌窦后鼻孔息肉中的表达及意义[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2024, 38(2): 7-12.
[14] 晏慧娟,肖旭平,钟宇. IL-29和TLR4在嗜酸性粒细胞浸润鼻息肉中的表达及临床意义[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2024, 38(2): 122-127.
[15] 伦英俊,陈晨,高宏程,范清琳,邰仁清. TLR4/NF-κB通道在糖尿病视网膜病变中的作用[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2024, 38(2): 163-168.
Viewed
Full text


Abstract

Cited

  Shared   
  Discussed   
No Suggested Reading articles found!